Caçar demônios e outras forças do mal têm sido, desde sempre, o que impulsiona a vida de Dean. Seu norte está claro desde a sua infância: Descobrir a verdade sobre o assassinato da sua mãe. E recentemente o motivo do desaparecimento do seu pai. Para isso é capaz de fazer qualquer coisa, vencer seus piores medos e inclusive pactar a entrega da sua alma com um demônio.
Depois de voltar do inferno, onde ele mesmo entregou a sua alma para salvar a vida do seu irmão mais novo, Dean parece não ser o mesmo de antes. O que ele viveu nesse obscuro mundo é um mistério que se nega a descrever, alegando a suposta ausência de lembranças sobre esses quatro meses. O certo é que Dean já não é o mesmo de antes, embora a vingança continue fazendo parte da sua vida atual.
Dean é interpretado pelo ator Jensen Ackles.
Sam Winchester
Sua mãe foi morta quando ele era um bebê, portanto ele não tem lembranças do ocorrido. Ele tentou levar uma vida normal e saiu de casa para cursar a faculdade, se afastando da família. Mas quando Dean o procura após quatro anos, os dois partem em busca do pai desaparecido. E depois que sua namorada é assassinada, ele decide encarar o destino de sua família e se une ao irmão nas caçadas pelas estradas americanas.
Na 4ª temporada, ele deixa para atrás os remorsos por exterminar os seres possuídos que enfrenta e demonstra ser tão capaz quanto seu irmão mais velho na luta contra os demônios e outras criaturas do mal. Mas Sam também tem seus segredos. As misteriosas habilidades que aprendeu a usar durante a ausência do irmão. E por alguma razão ele continua mentindo para Dean...
Sam é interpretado pelo ator Jared Padalecki
Bobby Singer
Bobby Singer (Jim Beaver) é um Caçador de Demônios profissional. Por muitos anos ele foi amigo de John Winchester, e agora é um tipo de pai substituto dos dois filhos de John, Sam e Dean. Ele aparece quando os meninos precisam dele. Sempre com uma literatura vasta sobre as criaturas sobrenaturais, encantamentos, exorcismos, objetos e contatos valiosos que salvam o episódio. Um personagem surpreendente que, acima de tudo, gosta dos meninos como filhos e os conhece bem.
Além de ser experiente, Bobby é também muito inteligente. Ele sabe exatamente o que fazer quando alguma coisa dá errada, sabe examinar a situação e sabe administrar os seus dons e conhecimentos.
Castiel
Castiel (Misha Collins) é o primeiro anjo autêntico a parecer na série. Ele surge na história como conselheiro de Dean e é seu contato com outros seres espirituais.
Castiel possui diversos poderes, sendo capaz de desaparecer ou se materializar no ar. Também pode matar ou exorcizar um demônio colocando a palma da mão na testa do intruso; e submeter alguns seres humanos indigestos, deixando-os inconscientes. Castiel é capaz de viajar no tempo, mas não pode mudar o passado. Apesar de possuir o poder da imortalidade e ser intocável aos ataques humanos, alguns demônios poderosos como Alastair são capazes de feri-lo ou até matá-lo.
Outros personagens
John Winchester - Jeffrey Dean Morgan
Ellen Harvelle - Samantha Ferris
Jo Harvelle - Alona Tal
Mary Winchester - Samantha Smith
Ash - Chad Lindberg
Meg Masters - Nicki Aycox
Ruby - Katie Cassidy (2007-2008)
Ruby - Genevieve Cortese (2008-2009)
Bella - Lauren Cohan
Uriel - Robert Wisdom
Gordon Walker - Sterling K. Brown
Chuck Shurley - Rob Benedict
Anna - Julie McNiven
Pamela Barnes - Traci Dinwiddie
Zacharias - Kurt Fuller
Lucifer - Mark Pellegrino